內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）是真核生物細(xì)胞中的一種細(xì)胞器，其形成扁平的，膜封閉的囊或稱為池狀的管狀結(jié)構(gòu)的互連網(wǎng)絡(luò)。 ER的膜與外核膜連續(xù)。 ER在大多數(shù)類型的真核細(xì)胞中發(fā)生，但在紅細(xì)胞和精子中不存在。 Cell Navigator 活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）染色試劑盒使用我們的ER Tracer Green作為ER標(biāo)記物。 ER Tracer 紅色染色是一種細(xì)胞滲透性熒光染料，對(duì)ER具有高度選擇性。 該染色劑由紅色熒光染料和ER粘合劑組成，其在大多數(shù)細(xì)胞類型中選擇性地結(jié)合ER。 對(duì)于某些細(xì)胞，ER Tracer Green可能無(wú)法選擇性地與ER結(jié)合。 ER Tracer Green具有與FITC基本相同的光譜特性，使該試劑盒便于使用FITC濾光片組。

溶液配制

1.儲(chǔ)備溶液配制      

將20μLDMSO（組分C）加入到ER red （組分A）的小瓶中并充分混合以制備500X ER red 儲(chǔ)備溶液。 注意：20μL的500X ER red 原液足以容納一個(gè)96孔板。 如果管子密封，未使用的500X ER red 儲(chǔ)備溶液可以在≤-20oC下儲(chǔ)存兩周。 避光。

2.工作溶液配制

將20μL500XER red 儲(chǔ)備溶液加入10 mL活細(xì)胞染色緩沖液（組分B）中，充分混合，制成ER red 工作溶液。 該ER red 工作溶液在室溫下穩(wěn)定至少2小時(shí)。 避光。

操作步驟

1.在細(xì)胞板中加入100μL/孔（96孔板）或50μL/孔（384孔板）的ER red 工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育細(xì)胞15-30分鐘，避光。 注意：ER探針的最佳濃度根據(jù)具體應(yīng)用而有所不同。 濃度高于工作溶液可能對(duì)細(xì)胞有毒。 可以根據(jù)特定細(xì)胞類型和細(xì)胞或組織對(duì)探針的滲透性來(lái)修改染色條件。

2.在每個(gè)孔中移除ER red 工作溶液。 用物理相關(guān)緩沖液洗滌細(xì)胞三次。

3.染色后修復(fù)細(xì)胞（可選）。 用4％甲醛固定細(xì)胞5-10分鐘。 用物理相關(guān)緩沖液洗滌細(xì)胞三次。

4.使用具有FITC濾光片組（Ex / Em = 490 / 520nm）的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的熒光信號(hào)。