過(guò)氧化酶是常用于與抗體按4:1比例結(jié)合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小，因此在與抗體、抗原結(jié)合形成復(fù)合物時(shí)不會(huì)帶來(lái)空間阻礙。與其它酶標(biāo)簽相比，過(guò)氧化酶也更便宜；其主要缺點(diǎn)是在保護(hù)劑（例如疊氮化鈉）存在的條件下溶解性低；而在低濃度下，過(guò)氧化酶的活性低。HRP偶聯(lián)物是廣泛用作ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）、免疫組化技術(shù)、Northern、 Southern和Western blot分析的第二個(gè)檢測(cè)試劑。Amplite比色法過(guò)氧化酶檢測(cè)試劑盒 *藍(lán)色* 提供了一種快速(10分鐘)HRP一步法均質(zhì)的、無(wú)需洗脫的分析方案。本試劑盒使用Amplite Blue，我們的超靈敏HRP顯色底物，即Amplite Blue作為過(guò)氧化酶的顯色底物，它比雙氧水和過(guò)氧化酶及其它的過(guò)氧化酶的顯色底物（例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue）具有更高的靈敏度。Amplite Blue產(chǎn)生高吸收物質(zhì)，在664nm處有最大吸收峰。這種近紅外吸收使自動(dòng)化檢測(cè)生物樣品時(shí)本底吸收很小。本試劑盒可以用于ELISA，酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)分析，氧化酶抑制劑高通量篩選等。試劑盒經(jīng)過(guò)最優(yōu)化處理，并且可用于高通量液體處理設(shè)備。

溶液制備 

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物儲(chǔ)備液（100X）：
將250μLDMSO（組分E）加入到Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物（組分A）的小瓶中以制備100X Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物儲(chǔ)備溶液。 應(yīng)立即使用原液，避光。

2. HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 U / mL）：

將1mL測(cè)定緩沖液（組分C）加入到辣根過(guò)氧化物酶（組分D）的小瓶中以制備20U / mL的HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3. H₂O₂儲(chǔ)備溶液（20 mM）：
將22.7μL的3％H₂O₂（0.88M，組分B）加入977μL的測(cè)定緩沖液（組分C）中以制備20mM H₂O₂儲(chǔ)備溶液。 注意：稀釋的H₂O₂溶液不穩(wěn)定。 應(yīng)丟棄未使用的部分。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

HRP標(biāo)準(zhǔn)
在1999μL分析緩沖液（組分C）中加入1μL的20U / mL HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液，得到10mU / mL HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD7）。 取10 mU / mL HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD7）并進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋?zhuān)玫竭B續(xù)稀釋的HRP標(biāo)準(zhǔn)品（SD6-SD1）和分析緩沖液（組分C）。

3.工作溶液

將50μL的100X Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物儲(chǔ)備溶液和50μL的20mM H₂O₂儲(chǔ)備溶液加入到4.9mL的測(cè)定緩沖液（組分C）中以制備HRP工作溶液，避光。